гибридизация колоний, метод Грюнштейна-Хогнесса
Метод выделения определенного фрагмента генома из его библиотеки genomic library - колонии анализируемых бактерий, выращенных на чашке Петри, перепечатывают на фильтр, после денатурации ДНК лизированных на фильтре колоний, несущих рекомбинантные плазмиды, их гибридизуют на фильтре с радиоактивным зондом, соответствующим искомой последовательности ДНК, гибридизовавшиеся колонии проявляются в виде темных пятен при авторадиографии (они могут быть выделены путем совмещения авторадиограммы с колониями живых бактерий исходной чашки Петри).
* * *
Колоний гибридизация, метод Грюнштейна-Хогнесса — метод индентификации in situ определенного фрагмента генома из библиотеки, а также клона или клонов, содержащих ту или иную последовательность ДНК. Для этого вначале делается реплика (перенос) с чашки, содержащей колонии, на нитроцеллюлозную мембрану, затем эта мембрана обрабатывается растворами, для того чтобы лизировать клетки и денатурировать ДНК. Однонитчатая ДНК закрепляется на фильтре, обрабатываемом раствором, содержащим радиоактивную ДНК или РНК. Происходит гибридизация комплементарных последовательностей и с помощью радиоавтографии выявляют колонии, содержащие искомую ДНК (проявляется в виде темных пятен).
Англо-русский толковый словарь генетических терминов. — М.: Изд-во ВНИРО. Арефьев В.А., Лисовенко Л.А., науч. ред. Л.И.Патрушев. 1995.